İmmunoelektroforez

İmmunoelektroforez bir hastanın kanındaki monoklonal antikorların laboratuar tanı tespiti için kullanılır. Monoklonal antikorlar aynı hücreden türetilir ve aynı antijenlere yöneliktir. Bu nedenle patolojik olarak değerlendirilmeli ve eğer kanıtlanırsa Waldenström hastalığı gibi hastalıklar için konuşulmalıdır.

İmmünoelektroforez nedir?

İyonların farklı hareket kabiliyeti vardır. Bu farklı hareketlilik elektroforez prosedürünün temelini oluşturur. Bu yöntemler, elektrik alanlarını ve yerçekimini kullanarak farklı maddeleri birbirinden ayırır. Bu alanda iyi bilinen bir yöntem, immünoelektroferezdir.

Bu, monoklonal antikorları tespit etmek için kullanılan kalitatif bir tanı yöntemidir. Antikorlar, belirli bir hücre hattından immünolojik olarak aktif protein maddeleridir. Monoklonal antikorların tümü aynı B lenfositlerine dayanır ve bu nedenle tek bir epitopa yöneliktir. İstilacı antijenlere karşı her doğal bağışıklık tepkisi bir poliklonal tepkiye karşılık gelir ve bu nedenle farklı epitoplara yöneliktir. Bu nedenle monoklonal bir bağışıklık tepkisi, patolojik vücut süreçlerinin göstergelerini sağlar.

Monoklonal antikorlar, farklı molekülleri yüksek özgüllükle bağlar. Bu bağlanma, immünoelektroforez aracılığıyla gösterilebilir. Prosedür, laboratuar teşhislerinde kalitatif bir prosedürdür ve iki tip prosedürden oluşur: serum elektroforezi ve immünodifüzyon.

İşlev, etki ve hedefler

İmmünoelektroforez, serum elektroforezinin metodolojisini immünodifüzyon ile birleştirir. Hastanın serumu bir agaroz jel veya selüloz asetat film üzerine yerleştirilir. Bir kontrol serumu da uygulanır. Uygulamayı, numunelerin elektroforetik olarak ayrılması takip eder. Normal elektroforez için antiserum, IgG, IgA, IgM, asetik asit ve ayırıcı hatlar arasına kappa ve lambda uygulanır.

Bu, hastanın serumundaki antikorlarla bir reaksiyon oluşturur ve bu da çökelme çizgileri oluşturur. Kullanılan antiseruma ve münferit hatların konumuna ve şekline bağlı olarak, hafif zincirler kappa veya lambda ile içerilen immünoglobulinler hakkında sonuçlar çıkarılabilir. Lambda bandı söz konusu olduğunda, antikorlardan oluşan serbest hafif zincirler vardır. Laboratuvar, immünoglobulinlerin kesin olarak belirlenmesine olanak tanıyan nadir IgE ve IgD aracılığıyla ek kanıt sağlar. Pierre Grabar ve Curtis Williams'a göre bir immünodifüzyon elektroforezi yöntemi gerçekleşir ve proteinlerin agaroz jel elektroforezi ve antikor difüzyonunun bir kombinasyonuna karşılık gelir.

İlk olarak agaroz jel elektroforezi gerçekleşir. Daha sonra, içerilen antikorlar antijen bantlarına karşı yayılır ve böylece çökelti kemerleri oluşturur. Bu ve her biri belirli bir konsantrasyonda antikorlara sahip olan bir agaroz jel içindeki proteinlerin elektroforezine karşılık gelen Laurell'in roket immünoelektroforezi arasında bir ayrım yapılmalıdır. Jelde, yalnızca antijenlerin taşınmasına izin veren ve çoğu antikoru, elektroforetik olarak hareket etmeyi bırakana kadar hafif bazik pH değerine maruz bırakarak izoelektrik noktaya zorlayan hafif bir tampon vardır.

Bir roket immünoelektroforezinin başlangıcında, fazla miktarda antijen vardır, böylece çözünür antijen-antikor kompleksleri oluşur. Elektroforez sırasında, antijenler ve diğer antikorlar arasında da bağlanma vardır. Bu şekilde, eşdeğerlik noktasında, antijen konsantrasyonuyla orantılı bir yüksekliğe sahip roket benzeri şekillere benzeyen immüno-çökeltiler oluşur. Testi değerlendirmek için çökeltinin yüksekliği ölçülür.

İlaçlarınızı burada bulabilirsiniz

Riskler, yan etkiler ve tehlikeler

Monoklonal antikorların tespiti, multipl miyelom ve Waldenström hastalığının teşhisi için özellikle önemlidir. Sağlanan kanıtlar, bağışıklık hücrelerinin kötü huylu bir dejenerasyonuna işaret ediyor. Multipl miyelom, plazmada antikor üreten hücrelerin kötü huylu çoğalması ile karakterize edilen kemik iliğindeki bir kansere karşılık gelir.

Bu plazma hücreleri, antikorları ve bunların parçalarını üretir. Kötü huylu plazma hücreleri her zaman ortak bir öncü hücreden gelir ve bu nedenle genetik olarak özdeştir. Sadece monoklonal antikor üretirler. Bu hastalığın habisliği, kanser öncesi bir aşamaya karşılık gelebilir, ancak aynı zamanda, tedavi olmaksızın hızla ölümcül olan oldukça kötü huylu bir aşamaya da ulaşabilir. Hastalığın semptomları, hücrelerin kötü huylu büyümesinden veya antikorlar ve antikor fragmanlarından kaynaklanır. En yaygın semptomlar arasında kemik ağrısı, kemik erimesi ve spontan kırıklar bulunur.

Kandaki kalsiyum seviyesi sıklıkla artar. Ek olarak, anormal antikorlar sıklıkla dokuda birikir ve organlarda fonksiyonel bozukluklara neden olur, bu da böbrek yetmezliği veya bozulmuş kan akışı gibi semptomlara yol açabilir. Waldström hastalığı aynı zamanda kötü huylu bir tümör hastalığıdır. Daha doğrusu, yavaş ilerleyen ve neredeyse asemptomatik B hücreli non-Hodgkin lenfomalar arasında sayılan kötü huylu bir lenfoma hastalığıdır. Çoğu durumda, hastalıkta habis lenfoma hücrelerinin aktivitesine bağlı olarak anormal monoklonal IgM üretimi tespit edilebilir.

Waldenström hastalığı, özelliklerinde multipl miyeloma oldukça benzerdir, ancak genellikle daha uygun bir seyir gösterir. Waldenström hastalığı olan çoğu hasta, teşhis konulduğunda büyük ölçüde asemptomatiktir. Diğer hastalar, miyelin kılıfı içinde monoklonal IgM birikiminin neden olduğu spesifik olmayan yorgunluk veya periferik nöropatiler gibi erken dönemde semptomlar gösterir. Küçük miktarlarda IgM bile polinöropatiyi tetikleyebilir. Diğer hastalarda yüksek seviyelerde bile polinöropati oluşmaz. Ayrıca ateş, istenmeyen kilo kaybı veya gece terlemeleri gibi spesifik olmayan semptomlar ortaya çıkabilir. Kemik ağrısı da karakteristiktir.

IgM'nin aşırı üretimi nedeniyle, kan hiperviskoz hale gelir, böylece bahsedilen semptomlar bir hiperviskozite sendromu ile ilişkilendirilebilir. Çoğu durumda, bu kanama eğilimi kendini sık burun kanamalarında, baş ağrılarında, genel halsizlik veya bulanık görme ve akustik şikayetlerde gösterir. Bu tip kötü huylu hastalıkları tespit etmek için, immünoelektroferez uzun zamandır standart bir teşhis prosedürü haline gelmiştir.