ELISA

Of the ELISA testi sözde antijen-antikor reaksiyonu ile sonuçlanan tıbbi bir laboratuvar muayenesidir. İnsan veya veteriner hekimlikte rol oynayan farklı antijenler test edilebilir. Almanya'da testi gerçekleştirmek için yalnızca akredite laboratuvar enstitüleri görevlendirilmiştir.

Prosedür nedir?

ELISA testi, tıbbi laboratuvar testleri içinde sözde immünolojik yöntemlerden biridir. Test prosedürü, çok çeşitli vücut sıvılarındaki protein moleküllerini tespit etmek için kullanılabilir.

ELISA kısaltmasıdır Enzim bağlı immünosorbent deneyi. Bu nedenle İngilizce bir isimdir, ancak Alman tıbbi kullanımında yerleşik hale gelmiştir.

ELISA testi, tıbbi laboratuvar testleri içinde sözde immünolojik yöntemlerden biridir. Test prosedürü, çok çeşitli vücut sıvılarındaki protein moleküllerini tespit etmek için kullanılabilir. Bu moleküllerin tespiti, belirli hastalıklar veya klinik tablolar hakkında sonuçlara varılmasına izin verir, bu nedenle doktorlar, teşhislerini de böyle bir ELISA testinin sonucuna bağlı kılar. Bu nedenle test prosedürü, günlük klinik uygulamada, ayakta tedavi veya yatarak tedavi için çok önemlidir.

Karşılık gelen vücut sıvıları, örneğin tam kan veya eklemlerden gelen sıvılar, hastadan alındıktan sonra doğrudan laboratuvara gönderilir. Örnekler genellikle çok acildir çünkü yerel malzeme hassas kabul edilir ve mümkün olan en kısa sürede incelenmelidir. Örtüşen numuneler, yanlış negatif sonuçlara yol açabilir çünkü tespit edilecek patolojik proteinler bu arada azaltılmış veya tamamen parçalanmış olabilir. Sözde ön analiz ELISA'da önemli bir rol oynar; şüpheli veya olumsuz sonuçlar klinik semptomlar varsa tekrar tekrarlanmalıdır.

İşlev, etki ve hedefler

Test tüpleri ve sözde mikrotitre plakaları, akredite bir tıbbi laboratuvarda doğru test için gereklidir. İnce, yarı içbükey girintilere sahip bu plakalar özel plastikten yapılmıştır ve her biri çok spesifik bir antikorla kaplanmıştır.

Algılanacak antijen incelenecek bir vücut sıvısında mevcutsa, sözde kilit ve anahtar prensibine göre spesifik bir antijen-antikor reaksiyonu gerçekleşir. Laboratuvar personeli numune materyalini pipetler kullanarak manuel veya tamamen otomatik olarak plakalara girebilir. Modern tıbbi laboratuvar enstitülerinde, ELISA teşhisini gerçekleştirmek için yalnızca tam otomatik sistemler kullanılır.

Ancak bunlar eğitimli personel, tıbbi-teknik laboratuvar asistanları tarafından izlenmelidir. Sözde iç ve dış kalite kontrolü, aynı zamanda laboratuvar tıbbı, enfeksiyon epidemiyolojisi ve mikrobiyoloji için tıbbi personele üstünlük sağlayan laboratuvar personelinin sorumluluğundadır. İlk denemeden sonra, yani materyal plakalara pipetlendikten sonra, varsa örnekteki spesifik antijenler plastik plaka üzerindeki antikorlara zaten bağlanmıştır.

Bunu, istenmeyen antijenler veya proteinler gibi bozucu faktörleri partiden uzaklaştırmak için fizyolojik salin solüsyonlu bir yıkama döngüsü izler. Yanlış pozitif reaksiyonlardan kaçınmak için bu adım çok önemlidir. Laboratuvar tarafından yanlış yorumlanan sözde olumlu bir sonuç, belirli koşullar altında bir hasta için ölümcül sonuçlar doğurabilir. Araştırmanın ikinci adımında, bir enzime bağlanan başka bir antikor eklenir. Bu etiketli antikor ayrıca antijene bağlanır.

Üçüncü ve son aşamada, belirli bir miktarda özel bir boya eklenir ve bu, kalan enzim kalıntıları tarafından büyük veya küçük ölçüde parçalanır. Sadece daha önce antikorla birlikte antijene bağlanmamış olan enzim parçalanabilir. Serbest enzim, eklenen boyayı parçalayabilir. Ayrılan boyanın kesin miktarı, fotometri adı verilen başka bir tıbbi laboratuvar yöntemi ile belirlenebilir. Bu, bir numune materyalinde antijenin mevcut olup olmadığı ve ne kadar olduğu konusunda kesin bir sonuca varılmasını sağlar.

ELISA testi yalnızca ilk teşhis için veya belirli hastalıklarda ve klinik tablolarda şüpheli tanıları doğrulamak için değil, aynı zamanda ilerlemelerini izlemek için de kullanılır. Testteki antijen konsantrasyonu tedavi sırasında düşerse, tedavi başarılı kabul edilir.

İlaçlarınızı burada bulabilirsiniz

➔ Savunma ve bağışıklık sistemini güçlendiren ilaçlar

Riskler, yan etkiler ve tehlikeler

ELISA testi, vücut sıvılarındaki antijenik yapıların tespiti yoluyla özellikle bilgilendiricidir. Test, vücut sıvılarında belirli antijenlerin varsayılan varlığı hakkında kalitatif, ancak aynı zamanda yarı kantitatif ve kantitatif bir ifadeye izin verir.

Muayene için tam kan kullanılamaz, sadece kan serumu kullanılabilir. Bu nedenle, hasta üzerinde, örneğin parmak ucunun kılcal kanından doğrudan bir test, diğer bazı serolojik testlerde olduğu gibi, bugüne kadar mümkün değildir. İnsan tıbbında ELISA testi öncelikle bakteriyel, viral veya fungal enfeksiyonlarda antijenleri tespit etmek için kullanılır. Ayrıca hepatit serolojisinin tüm pozitif sonuçları standart olarak ELISA testi ile tekrar kontrol edilir.

Hamilelik hormonu HCG gibi bazı hormonlar da ELISA testi ile belirlenebilir. Hamilelik sırasında belirli komplikasyonlar ortaya çıkarsa, gebelik hormonunun kandaki konsantrasyonunun kesin olarak bilinmesi teşhis ve tedavi açısından çok yararlıdır. Testin başka bir endikasyon alanı, örneğin multipl miyelom gibi çeşitli tümör hastalıklarında meydana geldiklerinde idrarda paraproteinlerin saptanmasıdır.

ELISA testi bugün hala birçok laboratuvar enstitüsünde yürütülmektedir, ancak uzmanlar tarafından güncel olmadığı kabul edilmektedir. ELISA testindeki enzime bağlı bağışıklık reaksiyonu, son yıllarda giderek daha iyi kantitatif sonuçlar sağlayan radyoaktif olarak etiketlenmiş antikorlarla değiştirildi. Bu testler ayrıca RIA, Radio Immunoabsorbent Assay olarak da bilinir. ELISA'nın diğer spesifik geliştirmeleri, lüminesans veya floresan gibi hafif kimyasal yöntemlerdir.